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更新時(shí)間:2016-07-08
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一種新型的實(shí)時(shí)細(xì)胞分析系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)病毒導(dǎo)致的細(xì)胞病變以及中和抗體對(duì)2009年的H1N1病毒的效力
RTCA系統(tǒng)是由四個(gè)部件組成:一個(gè)電子傳感器、一個(gè)機(jī)械裝置、E-plate、一個(gè)軟件控制單元。機(jī)械裝置放在組織培養(yǎng)箱中,能夠利用電子傳感器檢測(cè)E-plate上每個(gè)孔的電阻。在控制軟件的控制之下,CI是基于電子的阻抗,是細(xì)胞生長(zhǎng)狀況的代表。為了檢測(cè)實(shí)時(shí)分析細(xì)胞的擴(kuò)增情況。
為了獲得背景值,我們首先添加50ul的細(xì)胞培養(yǎng)基到96孔E-plate的每一個(gè)孔中,然后將每100ul培養(yǎng)基含有2倍濃度的MDCK細(xì)胞(稀釋梯度從4.0X104到2.5X103)接種到E-plate。將包含細(xì)胞的96孔E-PLATE放到室溫孵育30min,然后放到位于培養(yǎng)箱中的RTCA SP/MP裝置中,細(xì)胞值每15min自動(dòng)檢測(cè)一次。為了檢測(cè)*的TPCK-trypsin濃度,我們做了一個(gè)將細(xì)胞放在含有TPCK-trypsinDMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn),當(dāng)細(xì)胞達(dá)到預(yù)期時(shí),將
E-plate從RTCA系統(tǒng)中拿出,用DMEM培養(yǎng)基沖洗兩次。然后添加150ul的包含有TPCK-trypsin的MEM培養(yǎng)基(終濃度為10–0.31 mg/mL)。將E-PLATE立刻放到裝置中,繼續(xù)檢測(cè)CI值